การวิเคราะห์ PCR: มันคืออะไร? วิธีทดสอบ PCR อย่างถูกต้อง

ไม่นานที่ผ่านมามีความน่าเชื่อถือ,วิธีการที่สำคัญและรวดเร็วในการวินิจฉัยโรคติดเชื้อต่างๆของบุคคล วิธีนี้เรียกว่า "การวิเคราะห์ PCR" สิ่งที่เป็นสาระสำคัญสิ่งที่จุลินทรีย์จะสามารถเปิดเผยและวิธีการอย่างถูกต้องส่งมอบให้เราจะบอกในบทความของเรา

ประวัติความเป็นมาของการค้นพบ

คิดค้นวิธีการทำปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอร์ (PCR)นักวิทยาศาสตร์อเมริกัน Cary Myullis ในปี 2526 ได้รับการจดสิทธิบัตรในขั้นต้นจากวิธีการวินิจฉัยโดย บริษัท "Cetus Corporation" ซึ่งผู้สร้างของเขาได้ทำงาน แต่ในปี 1992 สิทธิและสิทธิบัตรทั้งหมดถูกขายให้กับ บริษัท "Hoffman-La Roche" หลังจากนั้นก็ปรากฏว่าการศึกษาที่คล้ายกันแบบคู่ขนานได้ดำเนินการและได้รับการบันทึกโดยนักชีววิทยาชาวอเมริกันคนอื่น ๆ เช่นอลิซเชงเดวิดเอ็ดการ์จอห์นเทรล ในปี 1980 โซเวียตนักวิทยาศาสตร์ A. Slyusarenko, A. Kaledin และ S. Gorodetsky ได้รับมือกับปัญหานี้ ดังนั้นจึงเป็นไปไม่ได้ที่จะกำหนดสิทธิ แต่เพียงผู้เดียว นักชีวเคมีที่โดดเด่นจำนวนมากได้มีส่วนร่วมในการพัฒนาวิธีการทำปฏิกิริยาลูกโซ่โพลาไรเซชันและจดสิทธิบัตรนวัตกรรมของพวกเขา ในขณะนี้การวิเคราะห์ PCR ดำเนินการทุกแห่งในห้องปฏิบัติการที่มีอุปกรณ์ครบครัน

สาระสำคัญของวิธีการวินิจฉัย PCR

การวิเคราะห์ PCR: มันคืออะไรและมันทำงานอย่างไร? สาระสำคัญของวิธีการคือการเพิ่มขนาดของจุลินทรีย์ที่จำเพาะโดยใช้เอนไซม์พิเศษของดีเอ็นเอโพลิเมอร์ในสภาพเทียม ในการทำเช่นนี้ให้คูณ DNA-material ที่มีอยู่ ดังนั้นในการปรากฏตัวของเชื้อจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรคในตัวอย่างปริมาณของมันจะเพิ่มขึ้นตามการทดลองห้องปฏิบัติการทางชีวเคมีและแบคทีเรียไม่สามารถตรวจพบได้ในกล้องจุลทรรศน์

การวิเคราะห์ PCR - มันคืออะไร?

การวิจัยวัสดุดำเนินการอย่างไร?

การวิเคราะห์จำเป็นต้องใช้:

  • แม่แบบดีเอ็นเอ
  • ไพรเมอร์ที่เชื่อมต่อปลายของชิ้นส่วนของวัสดุ
  • เอนไซม์ DNA polymerase ที่มีความร้อนสูง
  • สารเคมีที่ทำให้เกิดการทำงานที่เหมาะสมของเอนไซม์
  • สารละลายบัฟเฟอร์ที่จำเป็นในการสร้างสภาวะที่เหมาะสมสำหรับการเจริญเติบโตและการพัฒนาวัสดุดีเอ็นเอ

    การวิเคราะห์ PCR 12

ในการทำ PCR จะมีการทำซ้ำ 25-30 ครั้งประกอบด้วยขั้นตอนสามขั้นตอน ได้แก่ การทำให้เกิดการหลอมเหลวการหลอมและการยืดตัว

การวิเคราะห์ปฏิกิริยาลูกโซ่ polimezarnoyใช้อุปกรณ์พิเศษ - เครื่องขยายเสียง อุปกรณ์ที่ทันสมัยช่วยให้คุณสามารถตั้งโปรแกรมที่จำเป็นสำหรับการทำความร้อนและทำความเย็นหลอดเพื่อขจัดข้อผิดพลาดในระหว่างการวินิจฉัย

การวินิจฉัยใช้อยู่ที่ไหน?

วิธีการของปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอร์จะใช้ในด้านต่างๆของยา:

  • นักนิติวิทยาศาสตร์ใช้เพื่อระบุเนื้อหาทางพันธุกรรมเช่นเส้นผมน้ำลายหรือเลือด
  • การวิเคราะห์เลือดโดยใช้ PCR ช่วยในการสร้าง genotyping ตัวอย่างเช่นเพื่อตรวจหาการตอบสนองทางวิศวกรรมพันธุกรรมแต่ละตัวต่อยาเฉพาะชนิด
  • ด้วยความช่วยเหลือของวิธีการดังกล่าวจะทำให้เกิดความสัมพันธ์ในครอบครัวระหว่างคน
  • วิธีพีซีอาร์ที่ได้รับความนิยมมากที่สุดคือการวินิจฉัยทางการแพทย์สำหรับคำจำกัดความของโรคติดเชื้อต่างๆ

สิ่งที่ติดเชื้อพบ PCR?

ดังนั้นยาจึงใช้การวิเคราะห์ PCR มานานแล้ว คืออะไรเราได้เรียนรู้แล้ว และเชื้อโรคอะไรที่สามารถตรวจพบได้ด้วย? โรคติดเชื้อต่อไปนี้ได้รับการวินิจฉัยโดย PCR:

  • โรคตับอักเสบ A, B, C;
  • ureaplasmosis;
  • candidiasis;
  • หนองในเทียม;
  • mycoplasmosis;
  • ภาวะแบคทีเรีย;
  • mononucleosis ติดเชื้อ;
  • Trichomoniasis;
  • การติดเชื้อ papillomavirus;
  • วัณโรค;
  • การติดเชื้อเริมที่ 1 และ 2
  • Helicobacter pylori ติดเชื้อ;
  • cytomegalovirus;
  • โรคคอตีบ;
  • เชื้อ Salmonella;
  • การติดเชื้อเอชไอวี

    การวิเคราะห์ PCR สำหรับ HIV

นอกจากนี้วิธี PCR ใช้ในการวินิจฉัยโรคมะเร็ง

ข้อดีของวิธีการ

การวินิจฉัย PCR มีข้อดีหลายอย่าง:

  1. ความไวสูง แม้เพียงไม่กี่โมเลกุลของดีเอ็นเอของจุลินทรีย์การวิเคราะห์ PCR จะระบุถึงการติดเชื้อ วิธีการนี้จะช่วยในโรคเรื้อรังและแฝง บ่อยครั้งในกรณีดังกล่าวจุลินทรีย์จะไม่ได้รับการเพาะปลูกในรูปแบบอื่น ๆ
  2. สำหรับการศึกษาวัสดุใด ๆ เช่นน้ำลาย, เลือด, เซ็กส์, ผม, เซลล์ผิวมีความเหมาะสม ที่พบมากที่สุดคือการตรวจเลือดและการแสดงออกของปัสสาวะใน PCR

    PCR: ทำแบบทดสอบ

  3. ไม่จำเป็นต้องปลูกพืชระยะยาว ขั้นตอนการวินิจฉัยโดยอัตโนมัติช่วยให้คุณได้รับผลการศึกษาหลังจาก 4-5 ชั่วโมง
  4. วิธีนี้เชื่อถือได้เกือบ 100% บันทึกเฉพาะกรณีที่มีผลลบเท็จเพียงอย่างเดียว
  5. ความสามารถในการระบุหลายประเภทเชื้อโรคจากตัวอย่างเดียวของวัสดุ ไม่เพียงเร่งกระบวนการวินิจฉัยโรคเท่านั้น แต่ยังช่วยลดต้นทุนวัตถุดิบได้อย่างมาก บ่อยครั้งที่แพทย์กำหนดให้มีการวิเคราะห์ PCR ที่ครอบคลุม ราคาของการตรวจสอบประกอบด้วยคำจำกัดความของเชื้อโรคหกชนิดคือประมาณ 1500 รูเบิล

ข้อเสนอแนะในการเตรียมตัวสำหรับการวิเคราะห์

สำหรับผลลัพธ์ที่น่าเชื่อถือในการศึกษา PCR การวิเคราะห์ควรทำตามคำแนะนำสำหรับการเตรียมเบื้องต้นเพื่อการวินิจฉัย:

  1. ก่อนที่จะให้น้ำลายคุณควรงดอาหารและยา 4 ชั่วโมงก่อนที่จะนำวัสดุดังกล่าว ทันทีก่อนขั้นตอนล้างปากด้วยน้ำที่ต้ม
  2. ควรใช้กฎข้างต้นเมื่อนำตัวอย่างมาจากผิวชั้นในของแก้ม หลังจากล้างแล้วขอแนะนำให้ทำการนวดเบา ๆ เพื่อแยกการหลั่งของต่อม
  3. ปัสสาวะมักจะเก็บเกี่ยวที่บ้าน การทำเช่นนี้คุณจำเป็นต้องดำเนินการอย่างละเอียดห้องน้ำของอวัยวะเพศ จำเป็นต้องเก็บปัสสาวะ 50-60 มิลลิลิตรในภาชนะพลาสติกปลอดเชื้อ เพื่อให้แน่ใจว่าวัสดุมีความบริสุทธิ์ขอแนะนำให้ผู้หญิงใส่ผ้าอนามัยเข้าไปในช่องคลอดและผู้ชายจะดึงผิวหนังได้มากที่สุด คุณไม่สามารถใช้วัสดุในระหว่างการไหลเวียนโลหิตได้
  4. คุณต้องละเว้นจากการมีเพศสัมพันธ์ทำหน้าที่เป็นเวลา 3 วันก่อนการเก็บ นอกจากนี้แพทย์แนะนำให้ปฏิเสธที่จะเข้าเยี่ยมชมห้องซาวน่าและอาบน้ำร้อนดื่มเครื่องดื่มแอลกอฮอล์และอาหารรสเผ็ด 3 ชั่วโมงก่อนการทดสอบคุณต้องงดการปัสสาวะ
  5. สำหรับการคลอดด้วยปัสสาวะลูเทอร์เช่นถ้ามีการวิเคราะห์หา PCR จาก Chlamydia ทั้งหญิงและชายแนะนำให้มีการพักผ่อนทางเพศเป็นเวลา 3 วัน 2 สัปดาห์ก่อนการทดสอบไม่ควรใช้ยาต้านเชื้อแบคทีเรีย สำหรับสัปดาห์ที่คุณต้องหยุดใช้เจลที่ใกล้ชิด, ขี้ผึ้ง, ยาทาช่องคลอด, syringing 3 ชั่วโมงก่อนการทดสอบคุณต้องงดการปัสสาวะ ในระหว่างการมีประจำเดือนการเก็บรวบรวมวัสดุไม่ได้ดำเนินการเฉพาะหลังจาก 3 วันหลังจากการหยุดการไหลเวียนโลหิตอาจทำให้เกิดการติดเชื้อในทางอวัยวะเพศ

PCR ระหว่างตั้งครรภ์

ในช่วงคาดหวังของทารกที่ติดเชื้อมากโรคติดต่อทางเพศสัมพันธ์เป็นอันตรายอย่างยิ่งต่อพัฒนาการของทารกในครรภ์ปกติ โรค STDs สามารถทำให้เกิดการชะลอการเจริญเติบโตของมดลูกการคลอดก่อนกำหนดหรือการคลอดก่อนกำหนดเกิดจากความพิการ แต่กำเนิดของเด็ก ดังนั้นจึงเป็นเรื่องสำคัญอย่างยิ่งที่ต้องผ่านการทดสอบ PCR ในช่วงต้น จำเป็นต้องส่งการวิเคราะห์เมื่อลงทะเบียน - ไม่เกิน 12 สัปดาห์

การวิเคราะห์ Chlamydia PCR

วัสดุรั้วมีต้นกำเนิดมาจากคลองปากมดลูกด้วยความช่วยเหลือของแปรงพิเศษ ขั้นตอนนี้ไม่เจ็บปวดและไม่ก่อให้เกิดอันตรายต่อทารก โดยปกติในระหว่างตั้งครรภ์ chlamydia จะถูกวิเคราะห์ด้วยวิธี PCR รวมทั้ง ureaplasmosis, mycoplasmosis, cytomegalovirus, เริมและ papillomavirus การตรวจสอบที่ซับซ้อนเช่น PCR-6

PCR สำหรับการวินิจฉัยโรคเอชไอวี

ในการเชื่อมต่อกับความจริงที่ว่าวิธีการของปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอร์ปฏิกิริยามีความสำคัญกับการเปลี่ยนแปลงในร่างกายและเงื่อนไขของการวินิจฉัยหลายปัจจัยอาจมีผลต่อผล ดังนั้นการวิเคราะห์ PCR สำหรับการติดเชื้อเอชไอวีไม่ได้เป็นวิธีการที่เชื่อถือได้ประสิทธิภาพของมันคือ 96-98% ในอีก 2-4% กรณีการทดสอบจะให้ผลบวกเท็จ

แต่ในบางสถานการณ์โดยไม่ต้องมีการวินิจฉัย PCR ของเอชไอวีไม่ต้องจัดการ โดยปกติแล้วจะได้รับการบริหารให้กับคนที่มีผล ELISA ที่เป็นเท็จ ตัวบ่งชี้ดังกล่าวบ่งชี้ว่าบุคคลนั้นยังไม่พัฒนาแอนติบอดีต่อเชื้อไวรัสและไม่สามารถตรวจพบได้โดยไม่ต้องเพิ่มจำนวนขึ้นเป็นจำนวนมาก นี้สามารถทำได้โดยการดำเนินการทดสอบเลือดโดยใช้วิธี PCR

นอกจากนี้การวินิจฉัยโรคนี้เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับเด็กปีแรกที่เกิดจากมารดาที่ติดเชื้อเอชไอวี วิธีนี้เป็นวิธีเดียวในการกำหนดสถานะของเด็กได้อย่างน่าเชื่อถือ

PCR สำหรับการวินิจฉัยโรคไวรัสตับอักเสบ

สามารถทำปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอร์ได้ตรวจหา DNA ของเชื้อไวรัสตับอักเสบ A, B, C นานก่อนที่จะมีการสร้างแอนติบอดีต่อการติดเชื้อหรือมีลักษณะอาการของโรค การวิเคราะห์ PCR สำหรับโรคไวรัสตับอักเสบซีมีผลโดยเฉพาะอย่างยิ่งเนื่องจากใน 85% ของกรณีที่โรคดังกล่าวได้รับการรักษาโดยไม่มีอาการและไม่มีการรักษาอย่างทันท่วงทีผ่านเข้าสู่ภาวะเรื้อรัง

การตรวจเลือดด้วย PCR

การตรวจจับเชื้อก่อโรคอย่างทันท่วงทีจะช่วยหลีกเลี่ยงภาวะแทรกซ้อนและการรักษาที่ยืดเยื้อ

การสำรวจ PCR ที่ครอบคลุม

การวิเคราะห์ PCR ที่ซับซ้อน: มันคืออะไร? วิธีการทดสอบนี้ polimezarnoy ปฏิกิริยาลูกโซ่ซึ่งรวมถึงการพิจารณาการติดเชื้อชนิดพร้อมกันหลาย Mycoplasma genitalium, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, Candida, Trichomonas, cytomegalovirus, ureaplasma urealitikum 1 เริมและประเภทที่ 2 papillomavirus โรคหนองใน ราคาของการวินิจฉัยโรคนี้มีตั้งแต่ 2,000 ถึง 3,500 รูเบิล ขึ้นอยู่กับคลินิกวัสดุและอุปกรณ์เช่นเดียวกับประเภทของการวิเคราะห์: คุณภาพหรือเชิงปริมาณ สิ่งที่จำเป็นในกรณีของคุณ - แพทย์ตัดสินใจ ในบางกรณีคุณเพียงแค่ตรวจสอบสถานะของการติดเชื้อในคนอื่น ๆ เช่นเอชไอวีที่มีบทบาทสำคัญต่อการก่อการเชิงปริมาณ เรียกว่า "การวิเคราะห์ PCR ของ 12" ในการวินิจฉัยทั้งหมดของการตรวจสอบเชื้อโรคดังกล่าวข้างต้น

คำชี้แจงผลการวิเคราะห์

การถอดรหัสการวิเคราะห์ PCR ไม่ใช่เรื่องยาก มีเพียง 2 มาตราส่วนของตัวบ่งชี้คือ "ผลบวก" และ "ผลลบ" หากมีการตรวจพบเชื้อโรคหมอสามารถยืนยันการปรากฏตัวของโรคที่มีความเชื่อมั่น 99% และดำเนินการกับการรักษาผู้ป่วย ในวิธีเชิงปริมาณของการระบุการติดเชื้อในคอลัมน์ที่เกี่ยวข้องจะแสดงค่าตัวเลขของแบคทีเรียที่ตรวจพบ เฉพาะแพทย์เท่านั้นที่สามารถระบุระดับของโรคและกำหนดวิธีการรักษาที่จำเป็น

ที่จะผ่านการวิเคราะห์ PCR?

ในบางกรณีตัวอย่างเช่นในการพิจารณาการติดเชื้อเอชไอวีโดยใช้วิธี PCR ซึ่งมีผลในทางลบจำเป็นที่จะต้องทำการตรวจเพิ่มเติมเพื่อยืนยันผล

สถานที่ที่จะทำการวิเคราะห์?

สถานที่ที่จะส่งการวิเคราะห์ PCR: ในห้องคลอดของรัฐหรือในห้องปฏิบัติการส่วนตัว? แต่น่าเสียดายที่ในสถาบันการแพทย์แห่งชาติอุปกรณ์และวิธีการมักจะล้าสมัย ดังนั้นจึงเป็นการดีกว่าที่จะให้ความสำคัญกับห้องปฏิบัติการเอกชนด้วยอุปกรณ์ที่ทันสมัยและบุคลากรที่มีคุณภาพสูง นอกจากนี้ในคลินิกเอกชนคุณจะได้รับผลลัพธ์ที่รวดเร็วยิ่งขึ้น

ในกรุงมอสโกมีห้องปฏิบัติการเอกชนหลายแห่งการวิเคราะห์ PCR เกี่ยวกับการติดเชื้อต่างๆ ตัวอย่างเช่นในคลินิกเช่น Vita, Complex Clinic, Happy Family และ Uro-Pro การวิเคราะห์ PCR จะดำเนินการ ราคาของการตรวจสอบอยู่ที่ 200 รูเบิล สำหรับคำนิยามของเชื้อโรคชนิดหนึ่ง

สามารถสรุปได้ว่าการวินิจฉัยโรคติดเชื้อPCR ในกรณีส่วนใหญ่เป็นวิธีที่รวดเร็วและเชื่อถือได้ในการตรวจหาเชื้อโรคในร่างกายในระยะเริ่มแรกของการติดเชื้อ แต่ในบางกรณีการเลือกวิธีการวินิจฉัยอื่น ๆ ก็คุ้มค่า ความต้องการในการดำเนินการดังกล่าวสามารถกำหนดได้โดยผู้เชี่ยวชาญเท่านั้น การถอดรหัสการวิเคราะห์ PCR ต้องใช้วิธีการแบบมืออาชีพด้วย ปฏิบัติตามคำแนะนำของแพทย์และไม่ควรทำการทดสอบด้วยตนเองซึ่งไม่จำเป็น

ชอบ:
0
การวิเคราะห์ทางปัสสาวะด้วย Nechiporenko วิธีการประกอบมัน
การวิเคราะห์ปัสสาวะทั่วไป วิธีการใช้และสิ่งที่เป็นบรรทัดฐาน?
เลือดไฝถูกทดสอบด้วยอุจจาระ?
ที่จะใช้เห็บสำหรับการวิเคราะห์? จะทำอย่างไรเมื่อไร
การวิเคราะห์อุจจาระเป็นอย่างไร
วิธีการบริจาคโลหิตให้ฮอร์โมนอย่างถูกต้อง?
สามารถตรวจเลือดเพื่อตรวจหาเชื้อเอชไอวีได้
วิธีการส่งการทดสอบปัสสาวะอย่างถูกต้อง?
การวิเคราะห์ปัสสาวะจะบอกอะไร (ถอดรหัส)
บทความยอดนิยม
ขึ้น